sexta-feira, 6 de novembro de 2009

Vacina para a dengue em 2020?








Vírus Genes. 2009 Nov 3. [Epub ahead of print. Recombinant dengue virus-like particles from Pichia pastoris: efficient production and immunological properties. Liu W, Jiang H, Zhou J, Yang X, Tang Y, Fang D, Jiang L. Department of Microbiology, Zhongshan School of Medicine, Sun Yat-Sen University, 510080, Guangzhou, Guangdong, People's Republic of China. The envelope glycoprotein (E) of flavivirus is the major structural protein on the surface of the mature virions. The complexes of premembrane (prM) and E play important roles in virus assembly and fusion modulation and in potential immunity-inducing vaccines. In the present study, the cDNA encoding prM and E proteins of dengue virus type 2 (DENV-2) was subcloned into the pGAPZalphaA vector and further integrated into the genome of Pichia pastoris under the control of the glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAP) constitutive promoter. The high-level constitutive expression of recombinant E antigen was achieved in P. pastoris. Both the cell lysate and the culture supernatant, examined by electron microscopy, were found to contain DENV-2 virus-like particles (VLPs) with diameters of about 30 nm. After immunization of BALB/c mice, the VLPs exhibited similar efficacies as inactivated virus in terms of antibody induction and neutralization titer. These results suggest that recombinant DENV VLPs can be efficiently produced in the GAP promoter-based P. pastoris expression system. This system may be useful for the development of effective and economic dengue subunit vaccine. PMID: 19885726 [PubMed - as supplied by publisher]

Genes de virus. 2009 3 de noviembre. [Epub ahead of print]
Recombinante del virus del dengue-como las partículas de Pichia pastoris: la producción eficiente y propiedades inmunológicas.
Liu W, Jiang H, Zhou J, Yang X, Tang S, Fang D, Jiang L.

Departamento de Microbiología, Facultad de Medicina de Zhongshan, Sun Yat-Sen University, 510080, Guangzhou, Guangdong, People's Republic of China.
La glicoproteína de la envoltura (E) de flavivirus es la principal proteína estructural en la superficie de los viriones maduros. Los complejos de premembrane (PRM) y E juegan un papel importante en el ensamblaje del virus y la modulación de la fusión y el potencial en la inmunidad que inducen las vacunas. En el presente estudio, la codificación de DNA y proteínas prM E de virus del dengue tipo 2 (DEN-2) se subclonó en el vector pGAPZalphaA y más integrado en el genoma de Pichia pastoris bajo el control de la gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAP ) promotor constitutivo. El alto nivel de la expresión constitutiva de antígeno E recombinante se logró en P. pastoris. Tanto el lisado de células y el sobrenadante del cultivo, examinado por microscopia electrónica, se encontró que contienen DEN-2 partículas similares al virus (VLPs) con diámetros de alrededor de 30 nm. Después de la inmunización de ratones Balb / c, las VLPs expuesto eficacias similares a virus inactivado en términos de la inducción de anticuerpos y los títulos de neutralización. Estos resultados sugieren que DEN VLPs recombinantes pueden ser eficientemente producidos en el promotor de GAP sistema basado en la expresión de P. pastoris. Este sistema puede ser útil para el desarrollo de vacunas eficaces y económicos subunidad del dengue.

PMID: 19885726 [PubMed - según lo provisto por el editor]


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